缓冲液是维持溶液pH值相对稳定的重要试剂。在生物化学、分子生物学、细胞培养等实验中，大多数酶促反应和生物过程都对pH值非常敏感。即使是微小的pH波动，也可能导致实验失败或结果偏差。
缓冲液通过弱酸及其共轭碱（或弱碱及其共轭酸）的共存，能够在一定程度上抵抗外加酸碱的影响，维持pH值的相对稳定。选择合适的缓冲体系，是实验设计中的重要环节。不同的缓冲液适用于不同的pH范围和应用场景，正确的选择可以确保实验的稳定性和重复性。
PBS是实验室中使用最广泛的缓冲液之一，主要用于细胞培养、免疫实验、组织洗涤等。标准的1× PBS配方如下：
| 成分 | 用量（1L） | 作用 |
|---|---|---|
| NaCl | 8.0 g | 维持渗透压 |
| KCl | 0.2 g | 提供钾离子 |
| Na₂HPO₄·12H₂O | 3.58 g | 碱性组分 |
| KH₂PO₄ | 0.24 g | 酸性组分 |
配制步骤：
Tris缓冲液在分子生物学实验中使用广泛，特别是在DNA/RNA操作中。1M Tris-HCl (pH 8.0)的配制方法：
TAE是琼脂糖凝胶电泳中最常用的缓冲液。50×储存液配方：
使用时稀释50倍，即1×工作液。
pH调节应在定容之前进行。如果先定容再调pH，最终体积会超过目标体积，导致浓度不准确。调节pH时，应在室温下进行，因为pH值随温度变化。对于Tris缓冲液，温度每降低1℃，pH值约上升0.03。
配制缓冲液应使用高质量的去离子水或超纯水。普通蒸馏水可能含有CO₂或其他杂质，会影响pH值和缓冲效果。对于特殊实验（如细胞培养、质谱分析），可能需要使用更高纯度的水。建议定期检查水质的电阻率，确保符合实验要求。
大多数缓冲液可以在4℃保存数周至数月。但含有不稳定成分（如某些酶、还原剂）的缓冲液需要现配现用，或分装后-20℃保存。储存容器应清洁，避免微生物污染。建议分装成小份，避免反复冻融。
可能原因：CO₂溶解、微生物污染、成分降解
解决方法：现配现用、过滤除菌、添加防腐剂、密封保存
可能原因：浓度过高、pH不合适、离子强度过高
解决方法：调整浓度、检查pH、过滤除去沉淀
可能原因：浓度太低、pH远离pKa
解决方法：提高浓度、选择pKa接近目标pH的缓冲体系
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