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伯乐电泳仪如何挑选?都有那些注意事项?
2025-10-23 16:38:33 作者: 创始人 0

挑选伯乐(Bio-Rad)电泳仪时,关键在于明确您的具体实验需求。伯乐提供多种电泳系统,主要针对核酸(DNA/RNA)蛋白质两大类应用,每类中又细分为不同通量和尺寸的型号。

以下是详细的挑选指南和注意事项:


如何挑选伯乐电泳仪?


挑选电泳仪的核心步骤是根据您的①应用目的②样本通量③特殊需求来决定的。


第一步:明确您的主要应用


您是用于分离核酸(DNA/RNA)还是蛋白质?这是最首要的区别。

  • 如果您分离核酸 (DNA/RNA):

    • Sub-Cell 系列 (如 Sub-Cell GT): 这是最经典的水平电泳槽系列,适用于大多数核酸电泳。它有多种尺寸可选(Mini, Wide Mini, Standard),以适应不同大小的凝胶和样本量。

    • 特点: 坚固耐用、操作简单、配有方便的制胶托盘和梳子。

    • 应用: PCR产物鉴定、质粒酶切鉴定、RNA完整性检测、DNA片段回收等。

    • 技术: 通常使用琼脂糖凝胶水平电泳 (Horizontal Electrophoresis)

    • 对应伯乐系统:

  • 如果您分离蛋白质:

    • Mini-PROTEAN® Tetra 系统 (小型):

    • Criterion™ 系统 (中型):

    • PROTEAN® II xi / PROTEAN® Plus Dodeca™ (大型/高通量):

    • 特点: 最常用、最经典的垂直电泳系统。可同时运行1-4块小型胶(约 8.6 x 6.8 cm)。

    • 优势: 速度快(35-45分钟跑完)、试剂用量少、配套的预制胶(Precast Gels)种类繁多。非常适合日常的SDS-PAGE和Western Blotting。

    • 特点: 凝胶尺寸中等(13.3 x 8.7 cm),分辨率高于小型胶。

    • 优势: 样本上样量更大,条带分离更清晰,尤其适合需要精细区分相近分子量蛋白的实验。

    • 特点: 用于大型凝胶(16 x 16 cm 或更大)或高通量(Dodeca可同时运行12块胶)。

    • 优势: 适用于2D电泳的第二向分离、需要极高分辨率的实验或需要一次性处理大量样本的筛选工作。

    • 应用: SDS-PAGE(测定蛋白分子量)、Native-PAGE(分析天然蛋白)、Western Blot转膜、2D电泳(蛋白质组学)等。

    • 技术: 通常使用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳 (Vertical Electrophoresis / PAGE)

    • 对应伯乐系统:


第二步:考虑您的样本通量


  • 低通量(< 20个样本/次): Mini-PROTEAN 或 Mini Sub-Cell 系统足够使用。

  • 中通量(20-40个样本/次): Criterion 系统或 Wide Mini Sub-Cell 系统更合适。

  • 高通量(> 40个样本/次): Sub-Cell GT 的标准尺寸或高通量型号(如 Dodeca 系列)是必要的。


第三步:考虑配套设备和特殊需求


  • 电泳电源 (Power Supply): 电泳仪(电泳槽)必须配备合适的电源。

    • PowerPac™ Basic: 适用于大多数常规的核酸和蛋白电泳(如 Mini-PROTEAN 和 Sub-Cell)。

    • PowerPac™ HC/Universal: 适用于高电流(如转膜)或高电压(如IEF、测序)的实验。

    • 注意: 确保电源的电压(V)、电流(mA)和功率(W)范围能满足您所有实验(包括电泳和转膜)的需求。

  • 转膜系统 (Blotting): 如果您做Western Blot,还需要转膜设备。

    • 湿转 (Wet Transfer): 如 Mini Trans-Blot® Cell。转膜效果稳定、效率高,但耗时较长。

    • 半干转 (Semi-Dry): 如 Trans-Blot® Turbo™。速度极快(3-7分钟),但对高分子量蛋白的效率可能略低于湿转。

  • 预制胶 vs. 手灌胶:

    • 优点: 成本低、可灵活配置不同浓度(如梯度胶)。

    • 缺点: 耗时、重复性相对差、丙烯酰胺(PAGE胶原料)有神经毒性。

    • 优点: 方便快捷、重复性高、保质期长。Stain-Free™技术可实现3分钟内凝胶成像,无需考马斯亮蓝染色。

    • 缺点: 成本高于手灌胶。

    • 预制胶 (Precast Gels): 伯乐提供大量TGX™、Stain-Free™等预制胶。

    • 手灌胶 (Handcast): 需要自行配置试剂。



主要注意事项


无论您选择哪种型号,在使用伯乐电泳仪时都应注意以下几点:

  1. 安全用电:

    • 正负极连接: 必须正确连接电泳槽和电源。电泳时,核酸(带负电)从负极(黑)向正极(红)迁移;SDS-PAGE的蛋白(带负电)也是从负极(黑)向正极(红)迁移。“红对红,黑对黑”

    • 防止漏电: 确保缓冲液没有溢出到电泳槽外部。在连接或断开电极之前,务必先关闭电源

    • 缓冲液量: 必须按照说明书要求加入足量缓冲液,确保电极和凝胶完全浸没(尤其是垂直电泳的内槽缓冲液必须加满)。

  2. 化学品安全:

    • EB (Ethidium Bromide): 用于核酸染色的EB是强诱变剂。操作时必须全程佩戴手套,并在指定区域操作。接触过的所有物品(凝胶、缓冲液、枪头)都应作为有害废弃物妥善处理。

    • 丙烯酰胺 (Acrylamide): 配置PAGE胶的丙烯酰胺(Acr)具有神经毒性(粉末状态毒性最强)。操作时必须佩戴手套和口罩,在通风橱中进行。

    • TEMED 和 APS: 强氧化剂或催化剂,应避免吸入或皮肤接触。

  3. 设备维护:

    • 防止漏液(垂直电泳): 垂直电泳槽(如 Mini-PROTEAN)的玻璃板和密封条在安装时必须对齐、压紧,防止内槽缓冲液泄漏。可在加缓冲液前先用少量水测试是否泄漏。

    • 铂金丝保护: 电泳槽盖子上的铂金丝(电极)非常细,清洁时要小心,不要用硬物刮擦,防止其断裂。

    • 及时清洁: 每次使用完毕后,应立即倒掉缓冲液,并用去离子水(DI water)彻底冲洗电泳槽、玻璃板、梳子等部件,晾干存放。残留的盐分和凝胶碎屑会腐蚀电极或滋生细菌。

  4. 实验操作:

    • 拔梳子: 在凝胶完全凝固后,应缓慢、垂直地拔出梳子,避免撕裂点样孔。

    • 上样: 使用专用的上样枪头,缓慢将样品加入点样孔底部,避免冲出孔外或产生气泡。

    • 散热: 跑PAGE胶(尤其是高电压或厚胶)时会产生大量热量,可能导致条带变形("微笑"效应)。应在低温环境(如冷室)中进行,或使用带冷却循环的电泳槽。

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